我相信很多人一定都喝過(guò)植物蛋白飲料，不過(guò)很多人一定會(huì)好奇，這些植物蛋白飲料中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)是怎么提取出來(lái)的，下面我們就來(lái)為大家簡(jiǎn)單的介紹一下。

植物蛋白質(zhì)提取

關(guān)鍵點(diǎn)：a、種子研磨充分b、蛋白質(zhì)盡量溶解c、蛋白質(zhì)盡量沉淀

所需藥品：NaCl、C2H5OH、（NH4）2SO4、NaOH、HCl、CH3COOH﹑Na2SO4﹑冰水。

注：Na2SO4，芒硝，禁與強(qiáng)酸、鋁、鎂相配。

藥品溶解度：NaCl，36g[20℃]；（NH4）2SO4，76.7g[25℃]；Na2SO4，19.5g[20℃]，其中溶解蛋白質(zhì)的常用中性鹽是NaCl、（NH4）2SO4、Na2SO4、Mg2SO4等

①、鹽析法﹕

原理：蛋白質(zhì)在水溶液中的溶解度取決于蛋白質(zhì)分子表面離子周?chē)乃肿訑?shù)目，亦即主要是由蛋白質(zhì)分子外周親水基團(tuán)與水形成水化膜的程度以及蛋白質(zhì)分子帶有電荷的情況決定的。蛋白質(zhì)溶液中加入中性鹽后，由于中性鹽與水分子的親和力大于蛋白質(zhì)，致使蛋白質(zhì)分子周?chē)乃瘜訙p弱乃至消失。同時(shí)，中性鹽加入蛋白質(zhì)溶液后由于離子強(qiáng)度發(fā)生改變，蛋白質(zhì)表面的電荷大量被中和，更加導(dǎo)致蛋白質(zhì)溶解度降低，之后蛋白質(zhì)分子之間聚集而沉淀。民族品牌

由于各種蛋白質(zhì)在不同鹽濃度中的溶解度不同，不同飽和度的鹽溶液沉淀的蛋白質(zhì)不同，從而使之從其他蛋白中分離出來(lái)。簡(jiǎn)單的說(shuō)就是將硫酸銨、硫化鈉或氯化鈉等加入蛋白質(zhì)溶液，使蛋白質(zhì)表面電荷被中和以及水化膜被破壞，導(dǎo)致蛋白質(zhì)在水溶液中的穩(wěn)定性因素去除而沉淀。

步驟：溶解蛋白質(zhì)→離心→取上清液，鹽析（低溫）→離心沉淀蛋白質(zhì)→透析

②﹑等電點(diǎn)法（本方法中最好不要用Na2SO4）：

原理：在等電點(diǎn)時(shí)，蛋白質(zhì)分子以?xún)尚噪x子形式存在，其分子凈電荷為零（即正負(fù)電荷相等），此時(shí)蛋白質(zhì)分子顆粒在溶液中因沒(méi)有相同電荷的相互排斥，分子相互之間的作用力減弱，其顆粒極易碰撞、凝聚而產(chǎn)生沉淀，所以蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)，其溶解度最小，最易形成沉淀物。等電點(diǎn)時(shí)的許多物理性質(zhì)如黏度、膨脹性、滲透壓等都變小，從而有利于懸浮液的過(guò)濾。能量飲料品牌

步驟：溶解蛋白質(zhì)→離心→取上清液，調(diào)節(jié)PH，析出蛋白質(zhì)→離心沉淀蛋白質(zhì)→透析

③、有機(jī)溶劑法：

原理：有機(jī)溶劑能降低溶液的電解常數(shù)，從而增加蛋白質(zhì)分子上不同電荷的引力，導(dǎo)致溶解度的降低；另外，有機(jī)溶劑與水的作用，能破壞蛋白質(zhì)的水化膜，故蛋白質(zhì)在一定濃度的有機(jī)溶劑中的溶解度差異而分離的方法，稱(chēng)“有機(jī)溶劑分段沉淀法”，它常用于蛋白質(zhì)或酶的提純。使用的有機(jī)溶劑多為乙醇和丙酮。高濃度有機(jī)溶劑易引起蛋白質(zhì)變性失活，操作必須在低溫下進(jìn)行，并在加入有機(jī)溶劑時(shí)注意攪拌均勻以避免局部濃度過(guò)大。由此法析出的沉淀一般比鹽析容易過(guò)濾或離心沉降，分離后的蛋白質(zhì)沉淀，應(yīng)立即用水或緩沖液溶解，以降低有機(jī)溶劑濃度。操作時(shí)的pH值大多數(shù)控制在待沉淀蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)附近，有機(jī)溶劑在中性鹽存在時(shí)能增加蛋白質(zhì)的溶解度，減少變性，提高分離的效果，在有機(jī)溶劑中添加中性鹽的濃度為0.05mol/L左右，中性鹽過(guò)多不僅耗費(fèi)有機(jī)溶劑，可能導(dǎo)致沉淀不好。

步驟：溶解蛋白質(zhì)→離心→取上清液，向其中加乙醇（低溫）→離心沉淀蛋白質(zhì)

植物蛋白提取過(guò)程

現(xiàn)以等電點(diǎn)法提取大豆蛋白為例：

注：

①用0.01mol∕L Nacl溶液浸取，用NaoH溶液調(diào)節(jié)浸取液PH為7.5—9.0（8.0為宜）[梯度7.5、8.0、8.5]，溫度30℃~60℃（室溫亦可），每10mL浸取中加入1g大豆蛋白粉末，在振蕩器上震蕩1~2h。

②、⑤離心10~30min，轉(zhuǎn)速4000r∕min

③用鹽酸或乙酸調(diào)節(jié)溶液PH為3.0—6.0（4.5為宜）[梯度4.0、4.5、5.0]，沉淀時(shí)間為0.5~1h，輕微震蕩

④用0.5mol∕L Nacl溶液溶解沉淀并攪拌

⑥攪拌溶解，用NaoH溶液、鹽酸調(diào)節(jié)溶液PH至7.0

A.植物蛋白中主要含有清蛋白類(lèi)（可以溶于水、稀酸、稀堿、稀中性鹽中）和球蛋白類(lèi)（優(yōu)球蛋白不溶于水，溶于稀酸、稀堿、稀中性鹽中；擬球蛋白則全溶）。

B.待用等電點(diǎn)法取得一定量蛋白產(chǎn)品后，再用等電點(diǎn)法確定最適于蛋白質(zhì)溶解的PH及PI。鹽析法、有機(jī)溶劑法亦可用這些蛋白產(chǎn)品來(lái)確定有關(guān)溶劑的適宜濃度，最后實(shí)驗(yàn)時(shí)對(duì)這些濃度進(jìn)行微調(diào)以確定最佳。

數(shù)據(jù)記錄表：

浸取時(shí)間2h，離心時(shí)間20min，酸沉?xí)r間1h